En dehors du stéréotype du costume et des lunettes noires, les MIB sont souvent décrits par les témoins comme portant des vêtements passés de mode. Leurs yeux sont bridés, ils ont de longs doigts. Leur voix est souvent décrite comme « électronique », sans qu'ils utilisent d'appareils. Ils semblent aussi se déplacer dans des Cadillac noires (anciens modèles flambant neufs).
Il y a de nombreuses références aux MIB dans le cinéma et la télévision. Quelques exemples :
De nombreuses références ponctuelles aux MIB sont faites dans d'autres séries, l'homme en noir typique étant souvent utilisé pour représenter un personnage sinistre et autoritaire. On rencontre ce stéréotype dans le dessin animé Lilo et Stitch, où le personnage Cobra Bubbles est un ancien agent de la CIA qui a participé à l'incident de Roswell. On le retrouve également dans le film Mémoire effacée, où un homme, qui ne s'habille pas en noir, est considéré comme l'une de ces personnes chargées de mener une expérience.
En 1998, le film Ennemis non identifiés en fait mention.
Le jeu-vidéo Deus Ex, sorti en 2000, met en scène les hommes en noir dans beaucoup de niveau. Ils travaillent généralement conjointement avec le Majestic 12 pour garder les laboratoires de nano-technologie et la zone 51.
Dans le film Transformers (2007), on rencontre les agents du Secteur Sept, une organisation secrète du gouvernement des États-Unis. Ils sont décrits comme des MIB.
En 2007, Truth, un court métrage dirigé par Nic Collins, centré sur le complot des Hommes en Noir, dépeint ceux-ci comme des extraterrestres déguisés en humains, utilisant l'intimidation pour discréditer le témoin. Ce film fait aussi référence au Majestic 12.
Ce personnage semble naître peu après la Seconde Guerre mondiale à l'occasion de l'incident de l'île de Maury dont le récit, rapporté dans la presse, s'avéra par la suite mensonger. Le protagoniste principal, Harold Dahl, prétendait avoir rencontré des ovnis en juin 1947 à Maury Island près de Tacoma, puis avoir reçu le lendemain la visite d'un homme portant un costume noir semblable à celui des agents du gouvernement et conduisant une Buick neuve ; l'homme aurait exigé le silence sous peine de représailles.
Par la suite, le MIB se représentera souvent dans les récits de témoins, tout en subissant une évolution :
L'origine de ces personnages pourrait provenir de Gray Barker qui, dans son classique de l'ufologie They knew too much about flying saucers, introduisit pour la première fois la thématique des hommes en noir. À la fin des années 1990, John C. Sherwood révéla par que Gray Barker publiait dans son fanzine ufologique, sous forme d'articles (donc présentés comme objectifs), des textes qui au départ lui étaient soumis comme étant des nouvelles de science-fiction.